Nekoliko enzima koji se obično koriste u PCR eksperimentima

Lančana reakcija polimeraze, skraćenoPCRna engleskom je tehnika molekularne biologije koja se koristi za pojačavanje specifičnih fragmenata DNA.Može se smatrati posebnom replikacijom DNK izvan tijela, koja može znatno povećati vrlo malu količinu DNK.Tijekom cijelogPCRu reakcijskom procesu jedna klasa tvari igra vitalnu ulogu – enzimi.

1. Taq DNK

U pokusima u ranim danimaPCR, znanstvenici su koristili Escherichia coli DNA polimerazu I, Ali postoji problem s ovim enzimom: potrebno mu je nadoknaditi novi enzim svaki put kada se izvodi ciklus, što korake operacije čini pomalo kompliciranim i teško ga je potpuno automatski pojačati.Ovaj problem je riješen nakon što su znanstvenici slučajno izolirali Taq DNA polimerazu iz Thermus aquaticusa 1988. Od tada je automatsko umnožavanje DNK postalo stvarnost.Otkriće ovog enzima također činiPCRtehnologija prikladna, praktična i univerzalna tehnologija.Trenutno je Taq DNA polimeraza najčešća polimeraza u DNA kitovima.

2. PfuDNA

Kao što je gore spomenuto, Taq DNAza ima veliku pogrešku, pa su znanstvenici modificirali Taq DNA polimerazu do određene mjere kako bi izbjegli nespecifično pojačanje zbog nepodudaranja, što rezultira netočnim rezultatima testa.Ali modifikacija Taq DNA polimeraze može inhibirati aktivnost DNA polimeraze na sobnoj temperaturi.PfuDNA polimeraza može dobro nadoknaditi gore navedene nedostatke Taq DNA polimeraze, tako da se PCR reakcija može izvesti normalno, a stopa uspjeha amplifikacije ciljnog gena može se učinkovito poboljšati.

3. Reverzna transkriptaza

Reverzna transkriptaza otkrivena je 1970. Ovaj enzim koristi RNA kao predložak, dNTP kao supstrat, slijedi načelo sparivanja baza i sintetizira jednostruki lanac DNA komplementaran predlošku RNA u smjeru 5′-3′.Reverzna transkriptaza prvenstveno ovisi o aktivnosti DNA polimeraze iz DNA ili RNA šablona i stoga nema aktivnost 3'-5' egzonukleaze.Međutim, ima aktivnost RNaze H, koja do određene mjere ograničava duljinu sinteze reverzne transkriptaze.Zbog niske vjernosti i termostabilnosti divlje reverzne transkriptaze, znanstvenici su je također modificirali.

ZaPCReksperimenti, glavni potrošni materijal je: pojedinačna PCR epruveta, 4/8-traka PCR epruveta, PCR ploče.

Labio'sPCR potrošni materijalimaju sljedećeprednosti:

PCR ploče: Široka kompatibilnost termociklera;Visoki kontrast, laka identifikacija;dobro fluorescentna refleksija; dobroprijenos topline;Certificirani DNaza, RNaza, DNA, PCR inhibitori i testirano bez pirogena.

Pojedinačne PCR epruvete: Otporan na isparavanje; dobarprijenos topline;izvrsna optička jasnoća; Certificirani DNaza, RNaza, DNA, PCR inhibitori i testirano bez pirogena.

PCR epruvete s 4/8 traka: Ultratanke stijenke; visoka jasnoća; dobra refleksija fluorescencije;može se koristiti u farmaceutskoj industriji, prehrambenoj industriji i molekularnoj biologiji; visokokvalitetni, netaknuti PP materijal; certificirani DNase, RNase, DNA, PCR inhibitori i testirano bez pirogena.