Centrifugalna cijev je jednostavna cijev koja može izdržati veliku brzinu rotacije i pritisak, kao što je odvajanje nekih uzoraka i odvajanje sedimenata supernatanta.Cijev ultrafiltracijske centrifuge ima dva dijela slična unutarnjoj i vanjskoj cijevi.Unutarnja cijev je membrana određene molekularne težine.Tijekom centrifugiranja pri velikoj brzini, oni s manjom molekularnom težinom iscurit će u donju epruvetu (tj. vanjsku cijev), a oni s većom molekularnom težinom bit će zarobljeni u gornjoj epruveti (tj. unutarnjoj epruveti).Ovo je princip ultrafiltracije i često se koristi za koncentriranje uzoraka.
Ultrafiltracijske centrifugalne epruvete obično se mogu koristiti bez predtretmana, ali za obradu uzorka proteina, posebno za razrijeđene otopine proteina (< 10 ug/ml), stopa oporavka koncentracije s ultrafiltracijskim membranama često nije kvantitativna.Iako PES materijali smanjuju nespecifičnu adsorpciju, neki proteini, osobito kada su razrijeđeni, mogu imati problema.Stupanj nespecifičnog vezanja ovisi o strukturi pojedinih proteina.Vjerojatnije je da će se proteini koji sadrže nabijene ili hidrofobne domene nepovratno vezati na različite površine.Prethodna obrada pasivizacijom na površini cijevi ultrafiltracijske centrifuge može smanjiti gubitak adsorpcije proteina na površini membrane.U većini slučajeva, prethodna obrada kolone prije koncentriranja razrijeđene otopine proteina može poboljšati stopu oporavka, jer otopina može ispuniti prazna adsorpcijska mjesta proteina izložena na membrani i površini.Metoda pasivizacije je prethodno namakanje kolone s većim volumenom otopine za pasiviranje dulje od 1 sata, temeljito pranje kolone destiliranom vodom, a zatim centrifugiranje jednom s destiliranom vodom kako bi se potpuno uklonila otopina za pasivizaciju koja bi mogla ostati na filmu. .Pazite da se film ne osuši nakon pasiviranja.Ako ga želite koristiti kasnije, morate dodati sterilnu destiliranu vodu kako bi film ostao vlažan.
Ultrafiltracijske centrifugalne epruvete obično se ne mogu sterilizirati i ponovno upotrijebiti.Budući da cijena jedne tube nije jeftina, mnogi je ljudi pokušavaju ponovno upotrijebiti – iskustvo je da se površina membrane više puta čisti destiliranom vodom i jednom ili dvaput centrifugira.Mala epruveta koja se može centrifugirati obrnuto može se uroniti u destiliranu vodu i zatim centrifugirati obrnuto više puta, što će biti bolje.Može se više puta koristiti za isti uzorak i može se potopiti u destiliranu vodu kada se ne koristi, ali se mora spriječiti bakterijska kontaminacija.Nemojte miješati različite uzorke.Neki ljudi kažu da namakanje u 20% alkoholu i 1n NaOH (natrijev hidroksid) može spriječiti rast bakterija i spriječiti isušivanje.Sve dok ultrafiltracijska membrana prodire u vodu, ne smije se dopustiti da se osuši.Međutim, drugi kažu da će uništiti strukturu membrane.U svakom slučaju, proizvođači uglavnom ne podržavaju ponovnu upotrebu.Ponovljena uporaba će blokirati veličinu pora membrane filtera, pa čak i uzrokovati curenje tekućine, što će utjecati na eksperimentalne rezultate.
Vrijeme objave: 5. rujna 2022